In der Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC) werden Septen aus Polytetrafluorethylen (PTFE) und Silikonkautschuk gefertigt, da diese beiden Materialien eine ergänzende Reihe von Eigenschaften bieten, die für die analytische Integrität unerlässlich sind. PTFE bietet höchste chemische Inertheit, um die Probe vor Kontamination zu schützen, während Silikon die mechanische Flexibilität und die Wiederversiegelungsfähigkeit bietet, die erforderlich sind, um nach dem Durchstechen der Nadel ein geschlossenes, unter Druck stehendes System aufrechtzuerhalten.
Die Wahl ist nicht einfach PTFE gegen Silikon, sondern wie man sie am besten kombiniert. Ein laminiertes PTFE/Silikon-Septum nutzt die chemische Beständigkeit von PTFE als Schutzbarriere und die Elastizität von Silikon für eine zuverlässige, reproduzierbare Abdichtung und bietet damit die robusteste Lösung für moderne analytische Anforderungen.
Die entscheidende Rolle des Septums in der HPLC
Ein HPLC-Vialseptum dient als Schutzbarriere. Seine Hauptaufgabe ist es, das Vial abzudichten, um die Verdunstung von Lösungsmitteln und die Kontamination der Probe zu verhindern, während es gleichzeitig zulässt, dass eine Autosampler-Nadel hindurchsticht, um die Injektion durchzuführen, ohne das System zu beeinträchtigen.
Die Notwendigkeit einer perfekten mechanischen Abdichtung
Eine Schlüsselfunktion des Septums besteht darin, sauber von der HPLC-Nadel durchstochen zu werden und sich nach dem Herausziehen wieder vollständig zu verschließen. Dies ist eine mechanische Herausforderung.
Silikonkautschuk ist das ideale Material für diese Aufgabe. Seine weiche, elastische Beschaffenheit ermöglicht es der Nadel, mit minimalem Kraftaufwand hindurchzutreten, was den Verschleiß der Nadelspitze reduziert. Am wichtigsten ist, dass sein „Gedächtnis“ es ihm ermöglicht, das Einstichloch zu schließen, wodurch die Verdunstung von Lösungsmitteln verhindert und die innere Umgebung des Vials aufrechterhalten wird.
Die Notwendigkeit absoluter chemischer Inertheit
Die in der HPLC verwendeten mobilen Phasen und Probenlösungsmittel können hochaggressiv sein und starke Säuren, Basen und eine breite Palette organischer Lösungsmittel umfassen.
Das Septum darf mit diesen Chemikalien nicht reagieren oder sich unter deren Einfluss zersetzen. Wenn dies geschieht, können Materialbestandteile in die Probe auslaugen und Verunreinigungen einführen, die als „Geisterpeaks“ im Chromatogramm erscheinen und die Ergebnisse ungültig machen. Hier werden die Eigenschaften von PTFE unerlässlich.
Eine Geschichte von zwei Materialien
Keines der Materialien ist allein perfekt. Ihre wahre Stärke entfalten sie, wenn ihre Stärken kombiniert werden, um ihre individuellen Schwächen abzumildern.
Der chemische Schild: Die Kraft von PTFE
PTFE, bekannt unter dem Handelsnamen Teflon®, ist eines der am wenigsten reaktiven bekannten Materialien. Es ist praktisch immun gegen Angriffe durch die überwiegende Mehrheit der in einem Chromatographielabor verwendeten Chemikalien.
Reines PTFE ist jedoch ein relativ hartes und steifes Material. Es dichtet nach dem Durchstechen nicht gut ab, was es als alleiniges Septummaterial für wiederholte Injektionen ungeeignet macht.
Der widerstandsfähige Körper: Der Vorteil von Silikon
Silikonkautschuk bietet hervorragende Elastizität und thermische Stabilität und ist somit das perfekte mechanische Rückgrat für ein Septum. Es kann Hunderte Male durchstochen werden und bietet dennoch eine zuverlässige Abdichtung.
Die größte Schwäche von Silikon ist seine begrenzte chemische Beständigkeit. Bei Kontakt mit bestimmten organischen Lösungsmitteln wie Hexan, Toluol oder chlorierten Lösungsmitteln kann es aufquellen oder sich zersetzen, wodurch die Dichtung beeinträchtigt wird und möglicherweise Verunreinigungen ausgewaschen werden.
Das Beste aus beiden Welten: Das PTFE/Silikon-Laminat
Die häufigste und effektivste Lösung ist das laminierte Septum. Dieses Design besteht aus einer dünnen Schicht PTFE (ca. 0,005" bis 0,010") auf einer viel dickeren Schicht Silikon.
Im Vial zeigt die PTFE-Seite zur Probe und zum Lösungsmittel und wirkt als vollständig inertes chemisches Hindernis. Die Silikonschicht, die vor chemischem Kontakt geschützt ist, bietet die überlegene Flexibilität und Wiederversiegelungsfähigkeit. Diese Kombination liefert beide Eigenschaften optimal und ohne Kompromisse.
Verständnis der Kompromisse und Fallstricke
Selbst mit den idealen Materialien kann eine unsachgemäße Auswahl oder Verwendung zu Problemen führen. Das Verständnis dieser Einschränkungen ist der Schlüssel zur Gewährleistung einer zuverlässigen Analyse.
Das Risiko einer Lösungsmittel-Inkompatibilität
Die Verwendung eines reinen Silikonseptums mit inkompatiblen organischen Lösungsmitteln ist ein häufiger Fehler. Das resultierende Aufquellen kann dazu führen, dass sich das Septum vom Verschluss löst, was zu Probenverdunstung und fehlgeschlagenen Sequenzen führt. Überprüfen Sie immer die Lösungsmittelverträglichkeit.
Das „Coring“-Problem
„Coring“ tritt auf, wenn die Nadel ein kleines Stück des Septummaterials heraussticht, das dann in die Probe fällt. Dieses Partikel kann von der Nadel aufgenommen und die engen Schläuche des HPLC-Systems verstopfen, was zu erheblichen Ausfallzeiten und Reparaturen führt.
Der Wert von vorgeschlitzten Septen
Um das Coring zu minimieren und die zum Durchdringen erforderliche Kraft zu reduzieren, sind viele moderne Septen vorgeschlitzt. Ein kleiner Kreuz-, Y-förmiger oder einfacher Schlitz wird in die Mitte des Septums geschnitten. Dies bietet der Nadel einen Weg des geringsten Widerstands, verhindert Coring, reduziert den Nadelverschleiß und gewährleistet eine konsistentere Abdichtung, insbesondere bei Hochdurchsatzanwendungen.
Die richtige Wahl für Ihre Analyse treffen
Ihre Wahl des Septums sollte eine bewusste Entscheidung sein, die auf Ihrer spezifischen Analysemethode und Ihren Zielen basiert.
- Wenn Ihr Hauptaugenmerk auf Routineanalysen mit wässrigen Puffern liegt: Ein Standard-Silikonseptum kann eine kostengünstige und ausreichende Wahl sein, da das Risiko einer chemischen Inkompatibilität gering ist.
- Wenn Ihr Hauptaugenmerk auf der Methodenentwicklung oder Analyse mit organischen Lösungsmitteln liegt: Ein laminiertes PTFE/Silikon-Septum ist die sicherste und zuverlässigste Option, um Kontaminationen zu verhindern und die Datenintegrität zu gewährleisten.
- Wenn Ihr Hauptaugenmerk auf Hochdurchsatz-Screening oder Spurenanalyse liegt: Ein vorgeschlitztes PTFE/Silikon-Septum ist die überlegene Wahl, da es das Risiko von Coring minimiert und maximale Sauberkeit sowie Wiederversiegelungsleistung gewährleistet.
Die Wahl des richtigen Septums ist ein einfacher, aber entscheidender Schritt, um die Qualität und Zuverlässigkeit Ihrer chromatographischen Daten zu gewährleisten.
Zusammenfassungstabelle:
| Eigenschaft | PTFE (Teflon®) | Silikonkautschuk | Kombiniertes Laminat |
|---|---|---|---|
| Chemische Inertheit | Ausgezeichnet (beständig gegen Säuren, Basen, Lösungsmittel) | Schlecht (kann aufquellen/sich zersetzen) | Ausgezeichnet (PTFE zeigt zur Probe) |
| Mechanische Wiederversiegelung | Schlecht (steif, dichtet nicht gut wieder ab) | Ausgezeichnet (elastisch, dichtet nach dem Durchstechen wieder ab) | Ausgezeichnet (Silikon sorgt für die Abdichtung) |
| Hauptrolle | Chemische Barriere zur Vermeidung von Auslaugung | Flexibler Körper für Nadeldurchdringung und Wiederversiegelung | Optimale Lösung für beide Anforderungen |
| Am besten geeignet für | Schutz vor aggressiven Lösungsmitteln | Routineanalysen mit wässrigen Puffern | Methodenentwicklung, organische Lösungsmittel, Hochdurchsatz |
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